全程請戴手套操作，以免汙染91黑料看羞羞片网站入口bio-rad轉印槽！

　　1）電泳後SDS-PAGE 膠片浸在轉印緩衝液中，洗2~3 次，每次10min.

　　2）取出91黑料看羞羞片网站入口bio-rad轉印槽，先小心放一攪拌子在底部，再倒一半轉印緩衝液。

　　3）取轉印紙切成約如膠片大小，先在方形培養皿中以少許甲醇浸濕數秒鍾，再置入91黑料看羞羞片网站入口bio-rad轉印槽中的緩衝液10 min 後使用。 另取兩張濾紙，以及兩片方形海綿墊，都放在91黑料看羞羞片网站入口轉印槽的緩衝液中備用。

　　4）取出轉印夾打開平放，先墊一張方形海棉墊，鋪上一張濕濾紙，小心平鋪SDS-PAGE膠上去，然後小心迭上已潤濕的轉印紙，用塗菌玻璃棒趕出氣泡；轉印紙再滴上數滴緩衝液後，加蓋一層濾紙，及另一張海綿，也都不可陷入氣泡，即可把整個轉印三明治卡夾裝好。

　　膠迭到轉印紙時，一次成功，不要重作，否則蛋白質色帶可能會印上去，產生重迭影像。

　　5）將轉印三明治置入已經放有一半轉印緩衝液的91黑料看羞羞片网站入口bio-rad轉印槽中，注意有轉印紙的那一麵向正極（紅色），膠片那麵向負極（黑色）。

　　6）當三明治都放入91黑料看羞羞片网站入口bio-rad轉印槽後，以轉印緩衝液蓋滿所有的三明治，小心動一動卡夾，除去附在卡夾內外的氣泡，蓋上蓋子，放到一攪拌器上，打開攪拌器開始攪拌，同時接好電源，裝置完成後放置10 min.

　　7）以300mA開始轉印，溫度會漸漸上升，轉印1.5 h左右 後中止轉印，取出轉印三明治，打開後依次取出轉印紙及膠。

　　具體轉印條件要根據蛋白的大小進行優化，注意低溫。

　　8）轉印後的膠片可以繼續進行染色，看有無蛋白質殘留。若電泳時加有藍色標準蛋白質marker（SeeBlue），則可在轉印紙上看到藍色的色帶，確定轉印成功，並可評估轉印效率。